新型冠状病毒(2019-nCoV)引发的肺炎疫情仍在持续进展,针对新型冠状病毒(2019-nCoV)的治疗药物难以在短时间内研发出来。已经痊愈的患者,其体内存在大量针对2019-nCoV的特异性抗体,能否提取这些抗体用于治疗?在SARS期间就曾应用康复患者的血浆来治疗感染的病人[1],但在临床推广应用却存在技术困难,一是血浆成分复杂,安全性难以保证;二是需要的血浆量很大,实际难以大量实施该治疗方法[2]。
能否找到一种可以快速大量制备痊愈患者体内特异性抗体的方法?本文从以下几个方面进行探讨。
一、大量的研究及临床应用表明[3,4]:
1、使用针对病毒的特异性抗体,能有效地杀死病毒,是治疗病毒感染疾病的有效方法。从治愈患者体内分离出特异性抗体,再注射到同样病毒感染患者的体内,是最直接、最快速和最有效的治疗方法。
2、已治愈的病毒感染的患者,体内含有大量的针对该感染病毒的特异性抗体,并可持续半年左右的时间。治愈患者淋巴细胞能持续产生特异性抗体,如果能将该抗体分离出来,能很好地应用于同样病毒感染患者的治疗。
3、蛋白A免疫吸附能快速、大量地从治愈患者体内分离出抗病毒特异性抗体,而又不会对该患者造成伤害。
二、蛋白A免疫吸附分离制备免疫球蛋白的原理
1、分离原理:蛋白A免疫吸附柱中的
重组蛋白A分子可以选择性结合人体免疫球蛋白,然后通过酸性溶液将免疫球蛋白从吸附柱上洗脱并收集。具体步骤如下:
(1)通过体外循环,将血液从体内导出,经血浆分离器,把血细胞与血浆分开,血浆再经过蛋白A免疫吸附柱,该吸附柱能选择性地吸附血浆中的免疫球蛋白,经过血浆分离器和蛋白A免疫吸附柱后的血浆和血细胞会合后再回输入体内。
(2)被吸附在蛋白A免疫吸附柱上的免疫球蛋白通过酸性缓冲液洗脱下来,收集并中和后,即可获得含抗病毒的特异性免疫球蛋白溶液。
(3)吸附柱用中性缓冲液冲洗并恢复至中性后,可以恢复吸附能力,继续从血浆中吸附免疫球蛋白。
(4)如此循环操作,即可制备大量的免疫球蛋白。
制备过程示意图如下所示:
2、该制备方法的优点:
(1)对人体没有伤害。供体(志愿者)不会丢失除免疫球蛋白以外的任何血液成分,被吸附出来的含有抗病毒特异性抗体的免疫球蛋白,可以通过输入正常人丙种球蛋白得以补充。因此,不会对患者造成伤害。
(2)可以快速、大量制备免疫球蛋白。是目前分离制备免疫球蛋白最好的方法。5-6小时内可以在每个人(志愿者)体内分离出15-20克免疫球蛋白。每个人(志愿者)每周可以分离1-2次,不会对身体造成影响。
(3)和常规收集血浆再制备免疫球蛋白的方法相比,该方法不受血浆量的限制,可以反复多次制备,快速应对疫情需要。
参考文献:
1. 央视新闻客户端 2020年01月30日 01:37。新闻1+1丨康复者是否还会传染别人?专家:有抗体,一般不再传染。http://m.news.cctv.com/2020/01/30/ARTImY8HMZeVbyAYzaxAwRyS200130.shtml.
2. ”中国科普博览“公众号(kepubolan)。多位新冠肺炎患者治愈出院,为什么不提取他们血液中的抗体用于治疗https://tech.163.com/20/0131/12/F47HSOLV000999LD.html
3. Luke T, et al. Fully Human Immunoglobulin G From Transchromosomic Bovines Treats Nonhuman Primates Infected With Ebola Virus Makona Isolate. J. Infect. Dis. 2018 11 22;218
4. Liang MF, et al. SARS Patients-derived Human Recombinant Antibodies to S and M Proteins Efficiently Neutralize SARS-Coronavirus Infectivity. Biomed. Environ. Sci. 2005 Dec;18(6)