Protein A和Protein G有啥不一样

　对于IgG的纯化，相信好多小伙伴们都不陌生，大部分情况下我们都会选择使用Protein A或Protein G亲和层析。因为它们对于IgG具有特异性的亲和作用，而对于其他杂蛋白没有或者只有很弱的结合，具有极高的选择性。通常，仅仅凭借Protein A或Protein G一步亲和层析就可使我们的蛋白达到90%的纯度。那么做好第一步很关键，我们是选择Protein A还是Protein G呢？它们有啥不一样？

Protein A

Protein A是金黄色葡萄球菌表面的蛋白，分子量42kDa，有5个不同的结构域可以结合IgG的Fc片段，具有很强的特异性亲和力，每个Protein A分子至少可以结合两个IgG分子。同时，IgA、IgM或者IgE也有可能和Protein A结合。经过科研人员的不断努力，Protein A已经形成一个庞大家族：
★nProtein A：天然Protein A，无动物来源组分，载量约30mg人IgG/ml。
★rProtein A：重组Protein A ，C-端新增一个Cysteine，可以单一位点定向偶联于琼脂糖基架上，降低与抗体接触的空间位阻，提高了载量，约50mg人IgG/ml。
★ rmp Protein A：重组Protein A，多点结合于琼脂糖基架上，有效减少Protein A脱落，载量约30mg人IgG/ml。
★ MabSelect：基于高流速的Capto基架的高载量的rProtein A填料，载量约30mg人IgG/ml。
★ MabSelect  Xtra：更小粒径更多孔，更高动态载量，载量约40mg人IgG/ml。
★ MabSelect SuRe：偶联有耐碱的rProtein A，可以用0.1-0.5M NaOH清洗，载量约30mg人IgG/ml。
★ MabSelect SuRe LX：耐碱清洗，超高动态载量，载量约60mg人IgG/ml。

Protein G

Protein G并不是我们熟知的G Protein（细胞表面G蛋白）， 而是G族链球菌的细胞表面蛋白，分子量25kDa，和IgG的Fc区域特异性结合，还能以低亲力与Fab区域特异性的结合，但不与IgA和IgM结合。相比于Protein A，Protein G可以更广泛、更强地、与更多类型的IgG结合，但是载量却较低，约20mg人IgG/ml。 Protein A 和 Protein G虽然名字像，但对于不同物种和亚型的IgG的亲和力却有很大不同，这也是选择时的重要依据之一：