PCR实验室确切的中文名应该是“临床基因扩增实验室”。
临床基因扩增实验室主要就是利用该项技术来达到检验的目的。今天,我们不解释PCR的原理,只要知道PCR就是通过检测遗传物质DNA(或RNA)就足够了,并且这种方法的
特点有:
1、灵敏度高;
2、特异性好;
3、简单快速。
该项技术从诞生发展到现在也就几十年时间,但因为其优秀的特点,临床应用也越来越广,从病原体的核酸定量检测、基因分型,扩展到肿瘤基因突变、融合基因检测等,PCR技术因为其灵敏度比较高,随之而来的污染问题也是很严重的,所以PCR实验室最重要的工作就是防污染,这其中就包括规范化实验室的建设、质量管理体系的建立等等。
PCR技术不但可以大海捞针一样地寻找DNA,还可以“认出”不同型别的DNA,起到基因分型的作用。
基因分型类pcr检测:
1. 人CYP2C19基因分型检测
CYP2C19基因存在至少18种基因多态性,其中*2型和*3型是中国人群中最常见的两种等位基因型,分别为CYP2C19基因c.681G>A和c.636G>A的点突变。这些点突变引起CYP2C19基因编码的酶活性丧失,代谢底物的能力减弱,从而引起相关药物代谢的个体化差异,导致相关药物对于不同患者的疗效明显不同。
临床常用药物包括氯吡格雷、伏立康唑、质子抑制剂类药物、抗抑郁类药物、以及抗癫痫类药物等。通过检测患者CYP2C19基因型,判断患者代谢速率类型,合理调整用药剂量,是提高相关疾病治愈率,减少毒副作用的有效途径。
2. 人CYP2C9与VKORC1基因分型检测
临床常用的抗凝药华法林由CYP2C9代谢而其突变体使华法林代谢速率大大降低,用药个体在使用初期就有较高的出血危险性。人VKORC1基因具有遗传多态性,其编码的维生素K氧化还原酶是华法林的作用靶点,VKORC1启动子的基因多态性(-1639G/A)是影响华法林需求剂量个体差异的最主要因素。
GG基因型的个体需要较高剂量的华法林才能达到抗凝效果;而AA基因型的个体只需要很少剂量的华法林就能达到抗凝效果,过量的华法林会导致溶血等严重副反应。
3. 乙型肝炎病毒基因分型检测
HBV亚型的类别与HBV的致病性、临床表现及抗病毒药物治疗的选择都有一定的相关性。感染C型的患者肝脏损伤程度比B型严重,发生肝硬化及肝癌可能性更大,HBV D 型与多种严重肝病如肝硬化及肝细胞癌密切相关。而感染B型的患者对干扰素治疗有着更好的应答。因此临床上检测乙肝病毒亚型及耐药突变对及时调整治疗方案、指导临床用药及实时监控抗病毒药物疗效具重要的指导意义。